Ganoderma lucidum-ის კიბოს საწინააღმდეგო ეფექტი ადამიანის ოსტეოსარკომის უჯრედებზე

ჩვენი კვლევა აჩვენებს, რომ Ganoderma lucidum/reishi/lingzhi ავლენს სიმსივნის საწინააღმდეგო თვისებებს ოსტეოსარკომის უჯრედებზე in vitro.აღმოჩნდა, რომ Ganoderma lucidum აფერხებს ძუძუს კიბოს უჯრედების ზრდას და მიგრაციას Wnt/β-კატენინის სიგნალის ჩახშობის გზით.ის თრგუნავს ფილტვის კიბოს ფოკალური ადჰეზიების დარღვევით და MDM2 შუამავლობით Slug-ის დეგრადაციის ინდუქციის გზით.Ganoderma lucidum აფერხებს სარძევე ჯირკვლის კიბოს PI3K/AKT/mTOR გზის დაქვეითების გზით, Ganoderma lucidum ასრულებს ანტისიმსივნურ როლს მწვავე ლეიკემიის უჯრედებში MAPK გზის დაბლოკვით.

CCK-8 და კოლონიების ფორმირების ანალიზებმა, Ganoderma lucidum-ის ეფექტის შესაფასებლად ოსტეოსარკომის უჯრედების სიცოცხლისუნარიანობასა და პროლიფერაციაზე, აჩვენა, რომ Ganoderma lucidum თრგუნავს MG63 და U2-OS უჯრედების პროლიფერაციას დროზე და კონცენტრაციაზე დამოკიდებული გზით და ამცირებს უჯრედების კოლონიზაციის უნარი.

Ganoderma lucidum არეგულირებს პროაპოპტოზური გენების ექსპრესიას და ნაკადის ციტომეტრიის ანალიზმა აჩვენა, რომ MG63 და U2-OS უჯრედების აპოპტოზი გაიზარდა Ganoderma lucidum-ით მკურნალობის შემდეგ.უჯრედების მიგრაცია არის სხვადასხვა ბიოლოგიური ქცევის საფუძველი, მათ შორის ანგიოგენეზი, ჭრილობების შეხორცება, ანთება და კიბოს მეტასტაზები.Ganoderma lucidum ამცირებს ორივე უჯრედული ხაზის მიგრაციას და შეჭრას და აფერხებს პროლიფერაციას, მიგრაციას და ინვაზიას და იწვევს ოსტეოსარკომის უჯრედების აპოპტოზს.

არასწორი Wnt/β-კატენინის სიგნალიზაცია მჭიდრო კავშირშია მრავალი ტიპის კიბოს ფორმირებასთან, მეტასტაზებთან და აპოპტოზთან, Wnt/β-კატენინის სიგნალიზაციის უკმარისობით შეინიშნება ოსტეოსარკომაში.

ამ კვლევაში, ორმაგი ლუციფერაზას მომხსენებლის ანალიზებმა აჩვენა, რომ Ganoderma lucidum მკურნალობა ბლოკავს CHIR-99021-გააქტიურებულ Wnt/β-კატენინის სიგნალიზაციას.ეს კიდევ უფრო დადასტურდა ჩვენი დემონსტრირებით, რომ Wnt სამიზნე გენების ტრანსკრიფცია, როგორიცაა LRP5, β-კატენინი, ციკლინი D1 და MMP-9, ინჰიბირებულია, როდესაც ოსტეოსარკომის უჯრედებს მკურნალობენ Ganoderma lucidum.

წინა კვლევებმა აჩვენა კლინიკურ ნიმუშებში, რომ LRP5 ოსტეოსარკომაში ნორმალურ ქსოვილთან შედარებით მაღლა რეგულირდება და LRP5-ის გამოხატულება კორელაციაშია მეტასტაზურ დაავადებასთან და დაავადებისგან ცუდ გადარჩენასთან, რაც LRP5 ოსტეოსარკომის პოტენციურ თერაპიულ სამიზნედ აქცევს.

თავად β-კატენინი არის მთავარი სამიზნე Wnt/β-კატენინის სასიგნალო გზაზე და β-კატენინის ექსპრესია ოსტეოსარკომაში მნიშვნელოვნად გაიზარდა.როდესაც β-კატენინი ციტოპლაზმიდან ბირთვში გადადის, ის ააქტიურებს მისი ქვედა დინების სამიზნე გენების ექსპრესიას, რომელიც მოიცავს ციკლინს D1, C-Myc და MMP-ებს.

Myc არის ერთ-ერთი მთავარი პროტო-ონკოგენი და მნიშვნელოვან როლს ასრულებს გენის ექსპრესიის აქტივაციის, ტრანსკრიპციის და ინჰიბირების რეგულირებაში. ცნობილია, რომ C-Myc ონკოგენის დათრგუნვა იწვევს რამდენიმე ტიპის სიმსივნური უჯრედების დაბერებას და აპოპტოზს, მათ შორის ოსტეოსარკომა.

ციკლინი D1 არის მნიშვნელოვანი უჯრედული ციკლის G1 ფაზის რეგულატორი და აჩქარებს G1/S ფაზის გადასვლას.ციკლინ D1-ის გადაჭარბებულმა ექსპრესიამ შეიძლება შეამციროს უჯრედის ციკლი და ხელი შეუწყოს უჯრედების სწრაფ პროლიფერაციას სხვადასხვა ტიპის სიმსივნეებში.

MMP-2 და MMP-9 არის სტრომელიზინები, რომლებსაც აქვთ უჯრედგარე მატრიქსის კომპონენტების დეგრადაციის უნარი, რაც გადამწყვეტი ფუნქციაა სიმსივნის ანგიოგენეზისა და ინვაზიისთვის.

ეს ვარაუდობს, რომ Wnt/β-კატენინის სამიზნე გენები თამაშობენ მთავარ როლს ოსტეოსარკომის პროგრესირებაში და რომ ამ სასიგნალო კვანძების ბლოკირებას შეიძლება ჰქონდეს დრამატული თერაპიული ეფექტი.

შემდგომში, ჩვენ აღმოვაჩინეთ Wnt/β-კატენინის სიგნალიზაციასთან დაკავშირებული სამიზნე გენების mRNA და პროტეინის ექსპრესია PCR და Western blotting-ით.ორივე უჯრედულ ხაზში Ganoderma lucidum აფერხებდა ამ ცილების და გენების ექსპრესიას.ეს შედეგები ასევე აჩვენებს, რომ Ganoderma lucidum აინჰიბირებს Wnt/β-catenin სიგნალიზაციას LRP5, β-catenin, C-Myc, cyclin D1, MMP-2 და MMP-9 მიზანმიმართულობით.

E-კადჰერინი არის ტრანსმემბრანული გლიკოპროტეინი, რომელიც ფართოდ არის გამოხატული ეპითელური უჯრედებში და შუამავლობს ეპითელიუმის უჯრედებსა და სტრომულ უჯრედებს შორის ადჰეზიას.E-კადჰერინის ექსპრესიის წაშლა ან დაკარგვა იწვევს სიმსივნურ უჯრედებს შორის ადჰეზიის დაკარგვას ან შესუსტებას, რაც საშუალებას აძლევს სიმსივნურ უჯრედებს უფრო ადვილად გადაადგილდნენ, შემდეგ კი სიმსივნის ინფილტრაცია, დიფუზია და მეტასტაზირება.ამ კვლევაში ჩვენ აღმოვაჩინეთ, რომ Ganoderma lucidum-ს შეუძლია E-cadherin-ის რეგულაცია, რითაც ეწინააღმდეგება ოსტეოსარკომის უჯრედების Wnt/β-კატენინის შუამავლობით განპირობებულ ფენოტიპს.

დასკვნის სახით, ჩვენი შედეგები მიუთითებს, რომ Ganoderma lucidum ბლოკავს ოსტეოსარკომის Wnt/β-კატენინის სიგნალიზაციას და საბოლოოდ იწვევს ოსტეოსარკომის უჯრედების აქტივობის შემცირებას.ეს აღმოჩენები ვარაუდობენ, რომ Ganoderma lucidum შეიძლება იყოს სასარგებლო და ეფექტური თერაპიული აგენტი ოსტეოსარკომის სამკურნალოდ, დაკავშირებულ პროდუქტებში შედისგანოდერმა ლუციდუმის სპორის ზეთი რბილი გელები/რეიში სპორა ოილ რბილი გელები,Ganoderma lucidum სპორის ფხვნილი/რეიშის სპორის ფხვნილი